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你了解熒光染色原理知識嗎

更新時(shí)間:2021-08-06      點(diǎn)擊次數:7835
CytekTM Aurora光譜流式可配置高達5激光,3個(gè)散射光和64個(gè)熒光檢測通道,能夠滿(mǎn)足所有實(shí)驗室的需求。Aurora可以使用大量的熒光染料組合而無(wú)需為每個(gè)應用重新設置儀器。光學(xué)系統和低噪音的電子系統帶來(lái)了*的靈敏度和分辨率。擁有平頂光斑設計,結合*的液流系統,充分保證了高流速采集樣本的出色性能。
熒光染色原理:
免疫熒光染色:細胞膜上或細胞內的抗原分子與相應的熒光素標記McAb作用一定時(shí)間后形成帶有熒光素的抗原抗體復合物,經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出特定的熒光,其熒光強度與被測定抗原分子含量呈比例關(guān)系,由此可求得被測細胞與標記McAb相對應抗原的表達量和陽(yáng)性細胞百分比。
常用的熒光染料有異硫氰酸熒光素(FITC)、藻紅蛋白(PE)、別藻青蛋白(APC)和Perdinin葉綠素(PerCP)等,經(jīng)488nm激光激發(fā)后其發(fā)射熒光光譜有差別,因而可將其用于標記不同的McAb進(jìn)行單色或多色免疫熒光染色。目前,流式細胞術(shù)有單色、雙色、三色、四色、五色熒光分析,對細胞的分析更加精密、深入。
免疫熒光染色常用方法:
直接免疫熒光法:用一種(單色)或者多種(多色)熒光素標記的McAb染色細胞后測量其熒光強度和陽(yáng)性細胞數。
間接免疫熒光法:用一種McAb與細胞作用后,洗去未結合McAb,再加入熒光素標記的第二抗體(如羊抗鼠IgG-FITC),染色細胞后測量其熒光強度及陽(yáng)性細胞數。
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